Chymotrypsine

La chymotrypsine catalyse l'hydrolyse des liaisons peptidiques, en particulier celles qui sont adjacentes aux acides aminés aromatiques tels que la phénylalanine, la tyrosine et le tryptophane. Elle est naturellement produite par le pancréas sous la forme d'un zymogène inactif, le chymotrypsinogène, qui est activé dans le tube digestif.

• Triade catalytique: La chymotrypsine contient une triade _{Ser195-His57-Asp102} dans son site actif. Cette triade facilite l'attaque nucléophile sur le carbone de la liaison peptidique, conduisant à la coupure de la liaison.
• Spécificité du substrat: Elle préfère les liaisons peptidiques dont le groupe carboxyle est apporté par un acide aminé aromatique en raison d'une poche de liaison hydrophobe.
• Réaction en deux étapes:
  • Acylation: Formation d'un intermédiaire acyl-enzyme covalent.
  • Désacylation: L'eau hydrolyse l'intermédiaire, libérant le peptide clivé.
  • Conditions optimales: pH 7,0-8,0, température : 37-45°C.
  • Inhibiteurs: PMSF, aprotinine.

• Protéomique: Utilisée pour cliver les protéines au niveau des acides aminés aromatiques lors du séquençage et de la digestion des protéines avant la spectrométrie de masse (MS).
• Cinétique enzymatique: Enzyme modèle pour l'étude des mécanismes catalytiques et des relations structure-fonction.
• Études sur le repliement des protéines: Contrôle des protéases pour tester le repliement des protéines.
• Dissociation des tissus: En combinaison avec la trypsine ou la collagénase pour l'isolement des cellules en culture cellulaire.

• Disponible sous forme de poudre lyophilisée blanche.
• Conserver dans un récipient hermétique à une température comprise entre 2 et 8°C, à l'abri de la lumière.