La papaïne est une protéase à cystéine à large spectre dérivée du latex du fruit de Carica papaya (papaye). Elle se compose d'une chaîne peptidique unique avec trois ponts disulfures. Elle présente une forte activité protéolytique dans une large gamme de pH et est très stable dans diverses conditions biochimiques et industrielles. En raison de sa spécificité (préférence pour l'arginine, la lysine et la phénylalanine), de son efficacité, de son profil de sécurité et de son origine naturelle, la papaïne est largement utilisée dans la recherche et les applications commerciales.
Papaïne
| CAS No: | 9001-73-4 |
| EINECS No: | 232-627-2 |
| EC No: | 3.4.22.2 |
| Synonymes: | Papaye protéinase I, Papainase, Papaye peptidase I, Papayotin, Papainum, Pepsine végétale |
Résumé du produit
Fonction
La papaïne catalyse l'hydrolyse des liaisons peptidiques, avec une préférence pour les sites contenant de grands acides aminés hydrophobes tels que la phénylalanine, le tryptophane et la tyrosine. Elle agit par le biais d'un mécanisme de triade catalytique impliquant un thiol de cystéine (Cys-25) et un résidu d'histidine (His-159), permettant une attaque nucléophile sur les liaisons peptidiques.
- pH optimal : 6,0-7,0 (actif dans la gamme de pH 3-10)
- Stabilité à la température : Actif jusqu'à ~65°C
- Inhibiteurs : E-64, iodoacétamide (typiques pour les protéases à cystéine)
Mécanisme d'action
L'activité enzymatique de la papaïne passe par :
- L'attaque nucléophile de la cystéine catalytique sur le carbone d'une liaison peptidique.
- Formation d'un intermédiaire acyl-enzyme covalent.
- L'hydrolyse de l'intermédiaire pour libérer des fragments peptidiques clivés.
Cette catalyse à base de thiol est comparable à celle d'autres protéases à cystéine comme les cathepsines.
Applications
- Digestion et analyse des protéines en protéomique et enzymologie
- Dissociation des tissus pour la culture cellulaire et l'isolement des cellules primaires (par exemple, tissu neural)
- Isolation morphologique de neurones corticaux intacts de rats postnatals
- Cinétique enzymatique et études des inhibiteurs dans le cadre de la découverte de médicaments
- Production de fragments Fab d'anticorps
- Protéase modèle pour l'étude des relations structure-fonction des protéases à cystéine
- Synthèse enzymatique d'acides aminés, de peptides et d'autres molécules
Conditionnement et stockage
- Disponible sous forme de poudre lyophilisée blanche à légèrement jaune
- Stocker à 2-8°C (forme sèche) ; conserver congelé à -20°C pour une stabilité à long terme de l'enzyme.
Références
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- de Jersey J, Callahan PX. 1970: Specificity of papain. Biochem, 9(8):1761
- Mole J.E, Horton HR. 1973: Kinetic analysis of enhanced catalytic efficiency of papain. Biochem, 12(26):5285-9
- LaLonde JM, et al. 1998: Use of papain as a model for cathepsin K inhibitor design. J Med Chem, 41(23):4567-76
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- Shokhen M, et al. 2009: Protonation state of the catalytic dyad in papain. Proteins. 77(4):916–26
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